血清是细胞培养中重要的添加剂,提供了细胞生产所需的很多营养物质,包括蛋白质,生长因子,脂类,激素等等。然而,由于血清的成分比较复杂且无法测定,并且不同批次血清成分差异较大,使用无血清培养基可以很好的弥补使用血清带来的一些问题,也为实验的标准化和重复性带来很大的帮助。
一 无血清培养基的分类
无血清培养基的发展经历了包括无血清来源,无动物来源,无蛋白和化学成分限定几个阶段。无血清培养基在发展中逐渐摆脱对天然血清和动物源成分的依赖,在成分上更加的精准,明确和标准化,也可以避免外源物的污染,在生命科学领域获得了广泛的应用和发展。
无血清培养基从成分上可以分为四大类:
1无血清培养基,这种培养基不直接使用动物来源的血清作为成分,培养基中包含动物来源的蛋白来提供细胞生长支持;
2无蛋白培养基,无蛋白培养基是指完全不含有血清和动物来源的成分,培养基中含有植物蛋白的水解物,有利于细胞的生长。
3无动物源培养基,此培养基中不包含任何动物来源的成分,其中包含蛋白水解物,重组蛋白等替代动物源蛋白;
4化学限定培养基,这种培养基完全不含有血清,动物蛋白和植物水解物,仅包含已知结构和分子量的成分。化学成分明确,批次间差异小,是工业生产和重组蛋白常用的培养基。
二 无血清培养基的优势
成分明确
无血清培养基具有明确的成分,更有利于培养条件的标准化和实验的可重复性,血清的成分更加复杂和不可测定;
减少污染
相比于血清,无血清培养基更容易灭菌;
方便检测
无血清培养基成分明确,更容易纯化和进行下游的操作和检测;
可具有特异性
无血清培养基可以经过设计后特异性的促进特定细胞类型生长和分化。
三 无血清培养基在细胞治疗和基因治疗中的应用
无血清培养基由于其显著的优势,被广泛用于生物科研和工业生产中。目前无血清培养基主要用于重组蛋白,单克隆抗体,疫苗生产和基因治疗等领域。
在传统的细胞治疗和基因治疗细胞培养中,使用动物血清具有一些潜在的问题。由于血清批次间的差异性很大,而且可能含有不确定的外源因子,因此使用血清需要严格的安全和性能的检测,会导致成本和时间的增加,而使用化学成分限定,无血清,无动物源的培养基则可以很好的避免这些问题。
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